小鼠骨钙素ELISA试剂盒的操作注意事项主要包括以下几点：

1、试剂准备与保存：试剂盒从冷藏环境中取出后，应在室温平衡一段时间（通常为15~30分钟）后方可使用。未用完的板条应装入密封袋中保存，避免交叉污染。浓缩洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

2、加样操作：各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性。一次加样时间最好控制在5分钟内，如果标本数量多，推荐使用排枪加样。加样时应将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，避免产生气泡。

3、温育与洗涤：严格按照说明书标明的时间、温度进行温育操作。洗涤时，应充分拍干孔内液体，避免洗涤液残留影响结果。洗板次数和洗涤方式也需按照说明书进行。

4、底物孵育与终止：底物孵育时需注意避光，孵育时间不宜过长或过短。加入终止液后，应立即用酶标仪在指定波长处测定各孔的吸光度（OD值）。

5、结果判定：以标准品浓度做为横坐标，对应的吸光度（OD值）作为纵坐标，绘制标准曲线。通过样本的OD值，在标准曲线上查找对应的浓度值。如果样本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测。

此外，还需注意试剂盒的有限期，不同批号组分不得混用，且仅供科研使用，不得用于临床诊断。