本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)水平。用纯化的人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)，再与HRP标记的人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)浓度。


标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3辣根化物酶的（HRP）活性。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。


试剂盒限制性：
1、使用试剂盒配套的样品稀释液。
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