本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人辅酶A(A-CoA)水平。用纯化的人辅酶A(A-CoA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人辅酶A(A-CoA)，再与HRP标记的人辅酶A(A-CoA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人辅酶A(A-CoA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人辅酶A(A-CoA)浓度。


标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3辣根化物酶的（HRP）活性。

其他用品
1、酶标仪（450nm）
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒

操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

试剂盒限制性：
1、仅供科研使用，不得用于临床诊断。
天津越腾生物技术有限公司（Tianjin Yueteng Biotechnology Co., Ltd）是一家，集“产品研发、市场销售、技术服务”为一体的生物学试剂及试剂盒的生物公司，公司拥有一批业的研发人员，我们注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等域的多种试剂及试剂盒。同时，越腾生物提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类业试剂。我们的企业文化是为科研事业贡献绵薄之力!公司的核心价值是诚信为本，为客户提供高品质的产品、为员工提供发展平台、为社会创造更多价值。