人7α-胆固醇(7α-hydroxycholesterol)elisa检测试剂盒
货号:YT-H11604
英文简称:7α-hydroxycholesterol elisa试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人7α-胆固醇(7α-hydroxycholesterol)elisa检测试剂盒的浓度。
购买试剂盒,提供免费代测服务
操作程序:
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,0 值孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。
3、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
4、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。
7、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。
试剂盒限制性:
1、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。
2、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。


其他用品
1、酶标仪(450nm)
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根化物酶的(HRP)活性。
操作程序:
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,0 值孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。
3、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
4、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。
7、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。
生物安全:
1、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。
2、试剂盒的液体组分中,含有 proclin-300 防腐剂,可能引起皮肤过敏反应,避免吸入烟雾与皮肤接触。
3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入烟雾。
4、戴上防护手套,实验完成后洗手。
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免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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