人14-3-3zeta(14-3-3zeta)elisa检测试剂盒
货号：YT-H11624
英文简称：14-3-3zeta elisa试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人14-3-3zeta(14-3-3zeta)elisa检测试剂盒的浓度。
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使用试剂盒前，必须仔细阅读本说明书。
人14-3-3zeta(14-3-3zeta)elisa检测试剂盒实验原理 ：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗人14-3-3zeta(14-3-3zeta)抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人14-3-3zeta(14-3-3zeta)校准品和待测样本，再加入另一株 HRP 标记的抗人14-3-3zeta(14-3-3zeta)抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固
相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，产
生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪 450nm 波长上测定吸
光度（OD 值），吸光度（OD 值）与待测样品中人14-3-3zeta(14-3-3zeta)的浓
度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中人14-3-3zeta(14-3-3zeta)的
浓度
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3辣根化物酶的（HRP）活性。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作程序：
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，0 值孔加样本稀释液 50μL，空白孔不加，样本孔加待测样本 50μL。
3、除空白孔外，标准品孔、0 值孔和样本孔，加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL。
4、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
5、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 20S，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复 5 次。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡30s 的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。
7、所有孔加入终止液 50μL，在酶标仪上读取各孔吸光度（OD 值）。
试剂盒限制性：
1、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测前，请排除该因素。
2、通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
操作注意事项：
1. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
2. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
3. 所有液体组分使用前充分摇匀。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或小鼠体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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