人DNA转移酶3L(DNMT3L)elisa检测试剂盒
英文简称:DNMT3L elisa试剂盒
货号:YT-H11958
有效期:6个月
人DNA转移酶3L(DNMT3L)elisa检测试剂盒实验原理 :
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人DNA转移酶3L(DNMT3L)水平。用纯化的人DNA转移酶3L(DNMT3L)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人DNA转移酶3L(DNMT3L),再与HRP标记的人DNA转移酶3L(DNMT3L)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人DNA转移酶3L(DNMT3L)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人DNA转移酶3L(DNMT3L)浓度。


操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒限制性:
1、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。
2、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
技术提示:
1、混合蛋白溶液时,避免起泡。
2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。
3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。
4、使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。
5、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。
6、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。
7、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
8、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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