人T 钙粘蛋白(T-cad)elisa检测试剂盒
英文简称:T-cad elisa试剂盒
货号:YT-H12328
有效期:6个月
人T 钙粘蛋白(T-cad)elisa检测试剂盒实验原理 :
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人T 钙粘蛋白(T-cad)水平。用纯化的人T 钙粘蛋白(T-cad)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人T 钙粘蛋白(T-cad),再与HRP标记的人T 钙粘蛋白(T-cad)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人T 钙粘蛋白(T-cad)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人T 钙粘蛋白(T-cad)浓度。


操作程序:
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,0 值孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。
3、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
4、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。
7、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。
试剂盒限制性:
1、使用试剂盒配套的样品稀释液。
2、如果样本值高于标准品浓度值,请将样本适当稀释后,再重新测定。
生物安全:
1、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。
2、试剂盒的液体组分中,含有 proclin-300 防腐剂,可能引起皮肤过敏反应,避免吸入烟雾与皮肤接触。
3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入烟雾。
4、戴上防护手套,实验完成后洗手。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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