人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)elisa检测试剂盒
英文简称：CYP27A1 elisa试剂盒
货号：YT-H13036
有效期：6个月
人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)elisa检测试剂盒实验原理 ：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)水平。用纯化的人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)，再与HRP标记的人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人胆固醇27α羟化酶(CYP27A1)浓度。
操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒限制性：
1、使用试剂盒配套的样品稀释液。
2、如果样本值高于标准品浓度值，请将样本适当稀释后，再重新测定。
技术提示：
1、混合蛋白溶液时，避免起泡。
2、加校准品与样本时，每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头，公共组分应该悬臂加样，避免交叉污染。
3、合适的温育时间，和充分的洗涤步骤，是保证实验结果准确性的必要条件。
4、使用自动洗板机时，加入一个 30 秒浸泡的步骤，可以提高检测精度。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或小鼠体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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