大鼠前列腺素E2α(PGE2α)elisa试剂盒
货号:YT-R21311
英文简称:(PGE2α)elisa试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中大鼠前列腺素E2α(PGE2α)elisa试剂盒的浓度。
购买试剂盒,提供免费代测服务
使用试剂盒前,必须仔细阅读本说明书。
大鼠前列腺素E2α(PGE2α)elisa试剂盒实验原理 :
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗大鼠前列腺素E2α(PGE2α)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入大鼠前列腺素E2α(PGE2α)校准品和待测样本,再加入另一株 HRP 标记的抗大鼠前列腺素E2α(PGE2α)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固
相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产
生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪 450nm 波长上测定吸
光度(OD 值),吸光度(OD 值)与待测样品中大鼠前列腺素E2α(PGE2α)的浓
度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中大鼠前列腺素E2α(PGE2α)的
浓度


标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根化物酶的(HRP)活性。
其他用品
1、酶标仪(450nm)
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
产品特点
一、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
二、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型
操作注意事项:
1. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
2. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
3. 所有液体组分使用前充分摇匀。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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