小鼠蓖麻毒素(ricin)elisa试剂盒
货号:YT-M34128
英文简称:(ricin)elisa试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠蓖麻毒素(ricin)elisa试剂盒的浓度。
购买试剂盒,提供免费代测服务
使用试剂盒前,必须仔细阅读本说明书。
小鼠蓖麻毒素(ricin)elisa试剂盒实验原理 :
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗小鼠蓖麻毒素(ricin)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入小鼠蓖麻毒素(ricin)校准品和待测样本,再加入另一株 HRP 标记的抗小鼠蓖麻毒素(ricin)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固
相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产
生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪 450nm 波长上测定吸
光度(OD 值),吸光度(OD 值)与待测样品中小鼠蓖麻毒素(ricin)的浓
度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中小鼠蓖麻毒素(ricin)的
浓度


样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒限制性:
1、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。
2、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
操作注意事项:
1. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
2. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
3. 所有液体组分使用前充分摇匀。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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