大鼠DFGF(DFGF)elisa试剂盒
货号:YT-R22849
英文简称:(DFGF)elisa试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中大鼠DFGF(DFGF)elisa试剂盒的浓度。
购买试剂盒,提供免费代测服务
使用试剂盒前,必须仔细阅读本说明书。
大鼠DFGF(DFGF)elisa试剂盒实验原理 :
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗大鼠DFGF(DFGF)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入大鼠DFGF(DFGF)校准品和待测样本,再加入另一株 HRP 标记的抗大鼠DFGF(DFGF)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固
相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产
生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪 450nm 波长上测定吸
光度(OD 值),吸光度(OD 值)与待测样品中大鼠DFGF(DFGF)的浓
度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中大鼠DFGF(DFGF)的
浓度


标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根化物酶的(HRP)活性。
自备物品:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒限制性:
1、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。
2、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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