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小鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)elisa试剂盒
2023-12-06
产品详情
产地
国产
价格:
1200
产品名称
小鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)elisa试剂盒
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简介
小鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)elisa试剂盒
货号:
YT-M30233
英文简称:(α-SMA)elisa试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)elisa试剂盒的浓度。
购买试剂盒,提供免费代测服务
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
产品特点
一、、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;。
自备物品:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根化物酶的(HRP)活性。
操作程序:
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,0 值孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。
3、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
4、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。
7、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。
技术提示:
1、混合蛋白溶液时,避免起泡。
2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。
3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。
4、使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。
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免责声明 1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。 2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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