小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10;CXCL10)elisa试剂盒
货号:YT-M30283
英文简称:(IP-10;CXCL10)elisa试剂盒
操作程序:
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,0 值孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。
3、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
4、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。
7、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。


操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
其他用品
1、酶标仪(450nm)
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒
试剂盒限制性:
1、仅供科研使用,不得用于临床诊断。
2、在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不得使用。
3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
技术提示:
1、混合蛋白溶液时,避免起泡。
2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。
3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。
4、使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。
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