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植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA试剂盒现货供应,全国包邮
2024-11-08
高灵敏性植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA试剂盒现货供应,全国包邮,可免费代测,订购详询
产品:植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA试剂盒
货号:YT-P0320
品牌:越腾生物
包装规格:48T/96T
用途:仅供科研使用,不得用于临床诊断
产地:国产
标记物:HRP标记
检测方法:双抗体夹心法,竞争法
检测限:0.1 ng/ml
保质期:6个月
保存条件:冷藏2-8°C
适应物种:人,大鼠,小鼠,猴,鸡、羊等。
植物磷酸二酯酶(PDE)ELISA试剂盒实验原理 :
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗植物磷酸二酯酶(PDE)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入植物磷酸二酯酶(PDE)校准品和待测样本,再加入另一株 HRP 标记的抗植物磷酸二酯酶(PDE)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固 相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产 生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪 450nm 波长上测定吸 光度(OD 值),吸光度(OD 值)与待测样品中植物磷酸二酯酶(PDE)的浓 度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中植物磷酸二酯酶(PDE)的 浓度。
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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使用试剂盒前,必须仔细阅读本说明书。