货号:YT-P0219
英文简称:(IP)ELISA试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中植物焦磷酸酶(IP)含量。。
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使用试剂盒前,必须仔细阅读本说明书。
植物焦磷酸酶(IP)ELISA试剂盒实验原理 :
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物焦磷酸酶(IP)水平。用纯化的植物焦磷酸酶(IP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入植物焦磷酸酶(IP),再与HRP标记的植物焦磷酸酶(IP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物焦磷酸酶(IP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物焦磷酸酶(IP)浓度。
植物焦磷酸酶(IP)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。